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1概述

對(duì)于某些應(yīng)用場(chǎng)景，只有少量樣品可用于使用多種技術(shù)進(jìn)行分析。在制藥研究中，擁有 1 ml或更少蛋白質(zhì)樣品并需要進(jìn)行多次分析并不罕見(jiàn)。AccuSizer? 能使用小體積測(cè)量顆粒大小和濃度，本篇文章將提供AccuSizer用于微量樣品顆粒濃度檢測(cè)的實(shí)際案例。

2介紹

單顆粒光學(xué)測(cè)量（SPOS）是一種可以提供高準(zhǔn)確性和分辨率的顆粒大小和數(shù)量分析技術(shù)。通過(guò)讓?xiě)腋≡谝后w中的顆粒通過(guò)LE-400的傳感器，通過(guò)光阻擋和光散射的雙重探測(cè)器同時(shí)得到關(guān)于粒徑大小和顆粒數(shù)量的結(jié)果，通過(guò)進(jìn)樣體積得到樣品的顆粒濃度，因此，在測(cè)量的過(guò)程中樣品的體積必須是確定的。本文通過(guò)測(cè)量不同體積的樣品，來(lái)驗(yàn)證AccuSizer A2000 SIS對(duì)于樣品體積，顆粒大小和濃度的準(zhǔn)確性。

3材料和方法

用于進(jìn)行本技術(shù)說(shuō)明中描述的所有測(cè)試的樣品是來(lái)自MML公司的 15 μm標(biāo)準(zhǔn)粒子，批號(hào)為 NK20C。該標(biāo)準(zhǔn)粒子的濃度為3,118-4,218個(gè)/毫升。所有的測(cè)量是基于美國(guó)PSS粒度儀的AccuSizer  SIS產(chǎn)品，使用LE-400傳感器，校準(zhǔn)和使用的流速為15mL/min。在AccuSizer 780 A2000 SIS安裝一個(gè)1mL的注射器型進(jìn)樣器，使用的測(cè)量程序如下所述：

• 在測(cè)試之前用0.5ml的清洗液進(jìn)行沖洗；

• 所有測(cè)試的樣品，都取自相同規(guī)格900μl的標(biāo)準(zhǔn)樣品；

• 在抽取樣品之前的氣隙為0.05mL；

• 每次測(cè)量時(shí)注射器的凈體積為0.15mL；

測(cè)量是在以下樣品體積下進(jìn)行的：650、550、450、350、250、150 和 50 μl。所有測(cè)量均進(jìn)行了三次

4結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖中的表1和下一頁(yè)中的圖1所示。

表1. 650、550、450、350、250、150 和 50 μl實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

圖1. 樣品體積與顆粒數(shù)線性圖

所有濃度實(shí)驗(yàn)都在顆粒計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)的合格/不合格標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)得出結(jié)果。圖 1 中呈現(xiàn)的結(jié)果展示了樣品體積和計(jì)數(shù)之間預(yù)期的、良好相關(guān)的線性關(guān)系。

5結(jié)論

這項(xiàng)研究證明了 AccuSizer SIS 系統(tǒng)即使在低樣品體積下也能生成準(zhǔn)確的大小和計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)。雖然數(shù)據(jù)在 50 μL 時(shí)仍準(zhǔn)確，我們建議盡可能使用稍大一些的樣品體積，以便降低操作人員的測(cè)量難度。