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背景：

蛋白質組研究要得到準確可靠的結果，很大程度上取決于樣品的前處理方法。保持樣品的新鮮性和穩(wěn)定性，即樣品是否反映目標蛋白質在活體內的原始狀態(tài)尤為重要。一旦樣品從機體分離，調控平衡被打破，某些蛋白質或多肽將很快發(fā)生離體降解，導致蛋白質的種類、含量和修飾快速變化，使得檢測到的部分蛋白質或肽段實際上是高豐度蛋白質的降解產(chǎn)生的片段，而不是樣品中的原始蛋白質（如下圖，小鼠下丘腦組織離體1-10分鐘的樣品發(fā)生了顯著的降解）。

在細胞和組織表達的蛋白質組中，發(fā)揮重要生理功能、**研究意義和價值的蛋白質通常是一些含量很小、穩(wěn)定性差的低豐度蛋白質或多肽。隨著蛋白質檢測技術的發(fā)展，檢測方法的靈敏度越來越高，也對樣品前處理方法提出了更高的要求，如何在處理樣品過程中保留這些蛋白質或多肽就變得越來越重要。

因此，采用一種快速、有效的樣品穩(wěn)定方法，盡量縮短樣品采集與穩(wěn)定之間的間隔時間并將樣品前處理（穩(wěn)定）過程標準化，對于蛋白質研究具有重要意義。高質量的樣品前處理有利于獲得高質量的數(shù)據(jù)，進而增強分析結果的可靠性和可比性。

產(chǎn)品描述：

Stabilizor（生物樣本熱穩(wěn)儀）為瑞典生物技術公司（Denator）潛心研發(fā)及改進而成功推出的新型的**生物樣品穩(wěn)定技術。該系統(tǒng)包含Stabilizor主機和樣品卡，用于解決蛋白質離體降解的難題。Stabilizor 系統(tǒng)能快速、均勻、準確的將熱量傳遞給樣品，破壞蛋白質中的氫鍵，保留氨基酸鏈的共價肽鍵，即破壞蛋白質的二級及以上結構，保留一級結構的完整性。這種不可逆的失活效應將樣品中的各種酶類失活，從而將蛋白質離體降解的程度降到*低。處理過程中無需添加輔助抑制試劑，也將后期分析的干擾因素降到了*低。

該技術起源于**的瑞典 Uppsala 大學，課題組發(fā)現(xiàn)，由于神經(jīng)肽的豐度低、半衰期短，在依靠 LCMS 技術研究帕金森氏癥模型時其活性組分的信號難以捕獲到。后經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，依靠熱穩(wěn)定技術能徹底阻斷生物組織樣本的自然變化，實現(xiàn)即刻以及**性組織樣本的固化，保障后續(xù)針對蛋白質、多肽、以及大小分子生物標記物的高靈敏度、高準確性、極近體內（in vivo）、和原位（in situ）的分析，并依此推出了全球首款生物樣本熱穩(wěn)儀產(chǎn)品，在包括頂尖制藥企業(yè)、世界知名的實驗室、大學、研究院及生物技術公司廣泛采用，并依此在 Gene、Cell、Nature等雜志發(fā)表高端學術論文近百篇。

典型用戶：

瑞典 Lund University、瑞士 ETH Zürich 的 Reudi Aebershold 實驗室、瑞典 Linkoping 大學、Finland 的 Turku、美國哥倫比亞大學、英國曼徹斯特大學、英國 Proteome Science、英國 BioBank、美國 U Penn、美國癌癥中心、美國 CDC、比利時 Antwerp 大學醫(yī)院、德國 Lübeck 大學、美國普渡大學、澳大利亞 Livestock、中國首都醫(yī)科大學、丹麥 NovoNordisk、芬蘭 Turku 中心、愛爾蘭 Dublin 大學、日本國家癌癥研究院、荷蘭 Leiden 醫(yī)科大學、英國 St George Biomics 中心、美國科羅拉多大學、美國 Merck、法國 Sanofi、日本 Takeda、美國 Vanderbilt 大學、丹麥哥本哈根大學、芬蘭赫爾辛基大學、德國 Max-Planck 研究所、日本 Tokohuso 大學醫(yī)院、瑞典 Karolinska 研究院、耶魯大學、USAMRID、日本國立材料研究院、等等，用于腦、肝、胰腺、心、胸腺、等組織和異種移植、活組織檢查等方面的應用。

其他應用包括 Stabilizor™ 用于質譜（LC-MS、MALDI-TOF、MALDI-Imaging）鑒定和定量蛋白質、多肽、及翻譯后修飾；用于小分子的 MALDI-Imaging，研究藥物如脂質或 ATP 等在組織中的分布和代謝；用于磷酸化修飾的研究，通過固化，鎖定磷酸化避免其持續(xù)性轉化；用于靶標蛋白質組學分析和臨床蛋白質學分析；用于 2D 凝膠電泳分析及后續(xù) LCMS 分析，鑒定蛋白質在健康和疾病組織中的差異化表達；用于 Western Blot 分子生物學方法，利用抗體鑒定特殊蛋白質及其磷酸化。Stabilizor™ 在臨床蛋白質組學研究中，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)研究中的內源性多肽和磷酸化、癌癥研究中的蛋白質磷酸化修飾、肥胖癥及糖尿病的多肽如胰島素及其他荷爾蒙激素和磷酸化蛋白質、心血管疾病研究中的蛋白質表達及磷酸化的作用等，均有上乘表現(xiàn)。

原理：

Stabilizor 采用精密自動控溫加熱，通過快速熱傳導對酶蛋白進行不可逆改型及酶失活，保存機體內部真實的原生態(tài)，防止多肽、蛋白和小分子采樣后的進行性退化。熱滲透可快速（30秒）覆蓋整個鮮活組織或液氮急凍過的組織或細胞培養(yǎng)液，均勻和充分，使樣本不再**活性酶或在后續(xù)實驗中發(fā)生酶激活，保障組學（如質譜等等）或生物測定手段（如 Western Blot 等等）檢測到更多和新型的內源性肽、蛋白質，保鮮蛋白質的磷酸化修飾，真實反映大、小分子或代謝物的初始狀態(tài)。

固化后的樣品可于當日在室溫下進行組學分析或生物學測定，也可利用儲存卡冷凍，避免存儲及運輸中可能的污染。專業(yè)的試劑盒有助于多肽、激酶以及磷酸酶的固化，確保酶徹底失活和后續(xù)分析測定結果的高度可靠性和重現(xiàn)性。

熱穩(wěn)儀操作非常簡便，使用者僅僅針對新鮮或冷凍的待測樣品選擇相應的處理程序，記時、取樣，將存放了新鮮或冷凍組織樣品的儲存卡放入進樣滑板，儲存卡將被自動引入加熱區(qū)，綠燈亮起時即表示固化結束。熱固化儀非常人性化的設計是科學家和實驗室技術人員非常喜愛此項技術的原因。不論是新鮮的還是經(jīng)提前急凍過的組織樣品，均能以 Stabilizor T1 進一步熱固化，完善樣品預處理方案和輔助圓滿解決蛋白質的磷酸化修飾表征、內生肽表征、藥物代謝表征等復雜流程中的生物組織處理不夠穩(wěn)定和不能重現(xiàn)的生物學難題。

功能優(yōu)勢：

和傳統(tǒng)的固化方法如急凍法、抑制劑引入法、微波固化法等技術相比，使用 Stabilizor 系統(tǒng)可**去除蛋白酶和磷酸酶活性，防止蛋白質降解。降低蛋白質組復雜性，減少高豐蛋白質降解片段的干擾，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價值的內源性蛋白質/多肽生物標記物的可能性。Stabilizor處理樣品具有穩(wěn)定性、標準化和可追溯性，更易得到高質量的分析數(shù)據(jù)和“更真實、更原位、更快速”。 其創(chuàng)新點包括：

1) 綠色：純物理的樣品穩(wěn)定方法，不需使用干擾后期分析的酶抑制劑；無毒

2) 廣譜：可固化所有含水的組織、**性！無論是新鮮的還是急凍過的

3) 快速：處理時間短，一般在一分鐘以內即可將樣品中的各種酶類失活，快速、均勻、充分

4) 精確：激光測量樣本尺寸，特殊算法得出蛋白變性所需的準確能量

5) 智能：自由調節(jié)用于壓縮樣品的壓力；真空抽吸避免空氣干擾

6) 重現(xiàn)：樣品采集和儲存過程標準化，結果可靠，數(shù)據(jù)更具可比性，便于進行如比較蛋白質組研究

7) 持久：保留樣品在活體內蛋白質的磷酸化和其它翻譯后修飾的真實狀態(tài)，保留不穩(wěn)定、易降解的低豐度蛋白質

8) 靈敏：避免了樣品中低豐度蛋白質或多肽受高豐度蛋白質降解片段的干擾，有助于發(fā)現(xiàn)新的蛋白質、多肽以及它們的修飾形式

9) 便捷：**性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性，樣品經(jīng)穩(wěn)定后，即可在常溫下、從容地、進行制備操作，無需擔心酶對蛋白質、多肽的降解或改變它們的修飾形式

10) 準確：降低蛋白質組的復雜程度，縮小動態(tài)范圍，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價值的蛋白質或多肽生物標記物的可能性

11) 簡單：使用方便，在采樣的同時即可穩(wěn)定樣品，縮短樣品離體降解的時間，避免樣品污染

12) 實用：使 用 MALDI-MSI、Western Blot、nanoLC-MS 檢測目標蛋白質或多肽，Stabilizor 是目前*為有效的樣品穩(wěn)定方法

13) 溯源：所有參數(shù)均以電子記錄和可U盤儲存，方便管理和方法轉移

主要用途包括但不限于：

快速固化新鮮或急凍過的組織樣本或細胞培養(yǎng)液或干血斑

蛋白質磷酸化修飾的表征

內生肽表征

藥物代謝表征