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4D Lifetest TM -創(chuàng)新標(biāo)準(zhǔn)集成化單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng)

彗星實(shí)驗(yàn)分析（CA）的變化性一個(gè)重要問(wèn)題，因?yàn)椴煌瑓?shù)的旋轉(zhuǎn)柱不同， 例如：濃度、放卷時(shí)間、電泳持續(xù)時(shí)間、電壓梯度、電泳運(yùn)行溫度、使用的電泳槽類型四分之一的氣象參考標(biāo)準(zhǔn)。這些必然會(huì)導(dǎo)致不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)試結(jié)果的差異. 很大程度減少了彗星實(shí)驗(yàn)（CA）變化性帶來(lái)的影響物理參數(shù)（電泳槽）、協(xié)議（處理）、標(biāo)準(zhǔn)（生物樣品參考）。

瑞士4Ddlifetec公司開(kāi)發(fā)了具有以下優(yōu)點(diǎn)的創(chuàng)新4Dlifetank單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng)：

1、提供精確的溫度和溫度控制

2、具有**、高均勻性和可控電場(chǎng)

3、通過(guò)96孔凝膠定位板（GSP）的開(kāi)發(fā)，允許高穿透性分析

單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng)對(duì)比情況

1、4DLifetank單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng) VS 傳統(tǒng)的商業(yè)產(chǎn)品：

為了證明4dlifetank的準(zhǔn)確性，我們選擇了基準(zhǔn)商用CA電泳裝置進(jìn)行彗星分析CA。 使用行業(yè)參考細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)C0（未處理）和C1-C3（代表處理細(xì)胞內(nèi)的DNA損傷） 我們使用制造商建議（表1）進(jìn)行彗星分析CA。

使用蔡司AXIO顯微鏡（100個(gè)可重復(fù)彗星計(jì)數(shù)）并運(yùn)用OpenComet plugin的成像軟件進(jìn)行分析。

2、4D Lifetank單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng) 可變性評(píng)估：

為了評(píng)估可能的彗星分析CA變異性，我們比較了： a）斑點(diǎn)；b）孔板；c）進(jìn)行試驗(yàn)的天數(shù)

3、單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng)zui優(yōu)協(xié)議： 我們羅列了以下流程圖中的每個(gè)參數(shù)證明4D LifeTM彗星實(shí)驗(yàn)平臺(tái) zui優(yōu)協(xié)議（表1）

4、4D Lifetank單細(xì)胞凝膠電泳系統(tǒng) zui優(yōu)化： 為了評(píng)估我們zui優(yōu)化的彗星實(shí)驗(yàn)CA協(xié)議，我們用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的生物樣品做測(cè)試 展望—zui優(yōu)的生物標(biāo)準(zhǔn)品 作為增加細(xì)胞DNA損傷范圍和證明4Dlifetank性能的額外步驟， 我們創(chuàng)建了一套生物參考標(biāo)準(zhǔn)。電離輻射是易受傷害的強(qiáng)破壞劑， 因此使用X射線照射的A549電池（0-12Gy）并在4DLifeTank上運(yùn)行。

結(jié)論：

1、通過(guò)使用4dlifeTank彗星實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，我們觀察到劑量反應(yīng)改善，結(jié)果變異性降低

2、通過(guò)進(jìn)一步優(yōu)化CA協(xié)議，我們進(jìn)一步提高了CA的敏感性，并進(jìn)一步降低了變異性。

3、通過(guò)優(yōu)化生物樣品參考，并在4DLifeTank彗星實(shí)驗(yàn)平臺(tái)中以優(yōu)化的協(xié)議運(yùn)行這些參考，可以對(duì)自己的生物樣品進(jìn)行基準(zhǔn)測(cè)試。